現在、お使いのブラウザでは Javascript が無効になっています。JavaScript が無効になっていると、この Web サイトの一部の機能が動作しなくなります。
あなたの特定の詳細と関心のある特定の薬を登録してください。提供された情報を私たちの広範なデータベースの記事と照合し、すぐに PDF コピーを電子メールで送信します。
Ding Jingnuo, Zhao Weifeng, Department of Infection, Suzhou University First Affiliated Hospital, Suzhou City, Jiangsu Province, 215000 Tel.消化器系の腫瘍で、5 年全生存率は 14.1% です。多くの HCC 患者は進行した段階で診断されるため、HCC による死亡率を下げるには早期のスクリーニングが不可欠です。血清α-フェトプロテイン（AFP）、水晶体レクチン反応性α-フェトプロテイン（AFP-L3）、異常プロトロンビン（ビタミンK欠乏誘発性タンパク質II、PIVKA-II）などの一般的に使用される検出指標に加えて、体液生検技術HCC の検出において診断的価値があることが示されています。侵襲的処置と比較して、体液生検は循環する悪性代謝物を検出できます。体液生検技術は、循環腫瘍細胞、循環腫瘍 DNA、循環 RNA、およびエキソソームを検出し、HCC の早期スクリーニング、診断、および予後評価に使用されます。この記事では、高リスク HCC グループの早期スクリーニングを改善するために、HCC の早期評価のための実行可能な選択肢となる可能性のある有望なバイオマーカーを分離するための分子生物学とさまざまな体液生検技術の応用について概説します。キーワード: 体液生検技術、肝細胞癌、高リスク群 .
肝細胞癌 (HCC) は消化管の一般的な悪性腫瘍であり、男性と女性の両方で悪性腫瘍の新しい症例の中で 6 位にランクされています。1 世界的に、肝臓がんは肺がん、結腸直腸がんに次いでがんによる死亡原因の第 3 位であり、すべての悪性新生物によるがん関連死亡の 8.3% を占めています。1 HCC の予後は、診断時のステージと密接に関連しています。HCCの生存率が低い主な理由は、肝内転移、門脈腫瘍血栓、および切除を妨げる遠隔転移であり、これらの特徴の多くは診断時にすでに患者に存在しています。
診断および治療ガイドラインに基づくと、HCC を発症する主な危険因子は、肝硬変、慢性 B 型肝炎ウイルス (HBV) または C 型肝炎ウイルス (HCV) 感染、アルコール性脂肪肝疾患、および非アルコール性脂肪肝疾患 (NAFLD) です。 ）。さらに、HCC の危険因子には、アフラトキシンに汚染された食物の摂取、住血吸虫症、その他の肝硬変の原因、肝臓がんの家族歴、糖尿病、肥満、喫煙、および薬物誘発性肝障害が含まれます。35 歳および 45 歳のハイリスク グループは、定期的な健康診断を受ける必要があります。早期スクリーニングは、HCC 患者の全生存期間を改善するための重要な早期治療戦略です。
AFP、AFP-L3、PIVKA-II などのバイオマーカーは、HCC の早期スクリーニングに推奨されます3,4。リキッドバイオプシー技術は、早期診断と治療評価において有望な結果を示しています。5,6 HCC リキッドバイオプシーは大幅に進歩しており、AFP などの一般的に使用される血清マーカーよりも感度と特異度が高い可能性があります (表 1)。
AFP は、HCC で広く使用されているバイオマーカーであり、現在、疾患の早期スクリーニング、診断、および評価に広く使用されている最も詳細なバイオマーカーです。持続的に上昇した AFP レベルは、HCC 進行の危険因子と見なされます。7,8 小肝細胞癌 (sHCC) の検出率は、超音波およびコンピューター断層撮影法の開発に伴って増加しており、AFP は臨床診療において hHCC の検出に特に鈍感であることがわかっています。レトロスペクティブな多施設共同研究 9 によると、AFP 陽性は、HCC 症例の 46% (616/1338) および sHCC 症例の 23.4% (150/641) で発見されました。さらに、AFP レベルは、慢性肝疾患および肝硬変の患者で上昇します。したがって、AFP の sHCC に対するスクリーニング効果は限定的です。11 Asia-Pacific Clinical Practice Guidelines for Hepatocellular Carcinoma によると、AFP の使用は推奨されていません。 HCCの診断値が高い。13 組織生検と比較して、体液生検は主に体液 (血液、唾液、胸水、脳脊髄液、または尿) 中の腫瘍関連代謝物を検出し、組織への侵襲性が低くなります。さらに、リキッドバイオプシーは、原発腫瘍組織には存在しない悪性の特徴を反映している可能性があります。15 リキッドバイオプシーは、すべてのタイプの腫瘍の臨床現場でまだテストされていませんが、癌における診断の可能性は腫瘍学者の注目を集めています.体液生検では、循環腫瘍細胞 (CTC)、循環腫瘍 DNA (cDNA)、循環遊離 RNA (ecRNA)、およびエキソソームを検出できます。この記事では、ハイリスク HCC グループの早期スクリーニングにおけるさまざまな体液生検技術の特徴、役割、および適用について説明します。
健康な個人の血液サンプルに含まれる細胞外 DNA (cfDNA) は、1948 年に Mandel らによって初めて報告されました。17 cfDNA は、主にリンパ球と骨髄細胞に由来する長さ約 160 ～ 180 bp の無細胞 DNA 断片です。ctDNA は、腫瘍細胞によって末梢血に放出される特定の突然変異 DNA フラグメントであり、壊死、アポトーシス、排泄などの特定の病態生理学的プロセスの後に腫瘍細胞のゲノム情報を表します。総 cfDNA における ctDNA の割合は、腫瘍の種類によって大きく異なり、cDNA 断片の長さは通常 167 bp 未満であると報告されています。18 Underhill の研究では、cfDNA 断片は一般に正常な cfDNA よりも短いことが示されました。cfDNA フラグメントの長さの特定のサブセットの濃縮は、非転移性固形腫瘍に関連する cDNA の検出を改善することができます。研究によると、ctDNA は、膵臓、結腸、膀胱、胃腸、肝臓、卵巣、乳房、黒色腫、および頭頸部の進行がんの 75% 以上に見られることが示されています。20,21 しかし、血液中の ctDNA の量は、腫瘍の位置によって異なります。22 Bettegoud による研究では、結腸直腸、乳、肝臓、肺、および前立腺癌の患者は、他の癌よりも血中の cDNA レベルが高いことがわかりました。対照的に、口腔がん、膵臓がん、胃がん、神経膠腫の患者では、血中のcDNA濃度が低かった。21
ctDNA には原発腫瘍細胞と同じ遺伝子変異が含まれているため、cDNA を使用して、メチル化、ヒドロキシメチル化、一塩基変異、コピー数変異など、異種の腫瘍特異的変異やエピジェネティックな変化を検出できます。23
DNA メチル化は、遺伝子抑制をもたらす最も一般的なエピジェネティックな変化の 1 つです。正常細胞と比較して、腫瘍細胞ゲノムの全体的なメチル化レベル、特に腫瘍抑制遺伝子のメチル化に違いがあり、初期段階で検出することができ、DNA メチル化の変化が早期の指標になる可能性があることを示唆しています腫瘍形成の検出。HCCに関連する腫瘍抑制遺伝子は、プロモーターのメチル化によって不活性化され、それによって腫瘍形成が刺激されます。24 DNA メチル化は、その組織特異性、検出可能性、および年齢非依存性により、腫瘍の早期診断の理想的なマーカーです。さらに、ターゲットゲノムの各領域にはより多くのターゲット領域といくつかの変更された CpG 部位があるため、DNA メチル化は体細胞変異と比較してより一般的です。25 複数の CpG サイトに加えて、ctDNA の多数の独立した高メチル化遺伝子座が、DBX2、THY1、MT1M、INK4A、VIM、FBLN1、および RGS10 で特定されています。26 Xu et al.1098 人の HCC 患者と 835 人の健常対照者からの cfDNA サンプルを比較すると、HCC に関連する遺伝子は、対応する血漿 cDNA メチル化シグネチャと強く相関することがわかりました。実験室での分析に基づいて、感度と特異度がそれぞれ 85.7% と 94.3% の 10 のメチル化マーカーを含む予測モデルが開発され、これらのマーカーは、腫瘍量、腫瘍の病期、および治療への反応と高度に相関していました。これらの結果は、cDNA メチル化マーカーの使用が、HCC の診断、モニタリング、および予後において非常に有望であることを示しています。Lu ら 27 によって提示された 3 つの異常にメチル化された遺伝子 (APC、COX2、RASSF1A) と 1 つの miRNA (miR203) からなるメチル化モデルでは、HBV 関連 HCC を診断するためのモデル 27 の感度と特異性は同等でした。80%。さらに、このモデルは、AFP レベルが 20 ng/mL の未診断の HCC 患者の 75% を検出できました。Ras 関連ドメイン ファミリー 1A タンパク質 (RASSF1A) の遺伝子は、ヒトゲノムにおける主要な反復 DNA 配列です。アラウージョら。RASSF1A プロモーターの高メチル化は、HCC の早期スクリーニングの貴重なバイオマーカーであり、エピジェネティック療法の潜在的な分子標的である可能性があると結論付けました。28 ある研究では、血清 RASSF1A プロモーターの高メチル化が HCC 患者の 73.3% で発見されました。29 長い散在型ヌクレオチド要素 1 (LINE-1) は、もう 1 つの非常に活性な逆転位メディエーターです。LINE-1 の低メチル化は、HCC 血清サンプルの 66.7% の DNA で発見され、根治的切除後の早期再発および生存不良と関連していました。29 過剰メチル化は、肝硬変および HCC の発症において独特の役割を果たす一般的な遺伝的プロセスです。対照的に、ヒドロキシメチル化は、遺伝子の再活性化と発現を誘導する脱メチル化プロセスであり、このプロセスでの 5-ヒドロキシメチルシトシン (5-hmC) 生成物の検出は、腫瘍の同定に使用できます。cDNAのメチル化およびヒドロキシメチル化は腫瘍形成に関連しており、HCCの早期スクリーニングに寄与する可能性があります。2554 人の被験者を対象とした研究では、31 のゲノムワイドな 5-hmC が cfDNA サンプルで発見され、HCC 患者と慢性疾患などの高リスク群の 5-hmC 配列を比較することで 32 の遺伝子が特定されました。肝疾患の診断モデル。そして肝硬変。このモデルは、非腫瘍組織から HCC を区別する点で AFP よりも優れていました。
コード領域の変異は転写異常を引き起こし、タンパク質配列の変化を引き起こし、最終的にはがんを引き起こす可能性があります。一塩基変異体は、組織の信頼性が高く、腫瘍および組織の特異性が高いため、早期腫瘍スクリーニングの重要なゲノムマーカーです。がんのエクソームおよび全ゲノム配列決定に次世代シーケンシング (NGS) を使用した多数の HCC 関連の研究により、TP53 や CTNNB1 などの一般的な変異細胞遺伝子、および ARID1A、MLL、IRF2 などのいくつかが特定されています。新しい遺伝子、ATM、CDKN2A、FGF19、PIK3CA、RPS6KA3、および JAK1 は、中程度の突然変異率を示しています。 変異遺伝子機能解析は、クロマチンリモデリング、Wnt/β-カテニンおよび JAK/STAT シグナル伝達、P53 細胞周期経路、エピジェネティック修飾因子、酸化ストレス経路、PI3K/AKT/MTOR 経路および RAS/RAF/ MAPK キナーゼ経路は、HCC の発癌において重要な役割を果たします。 .34 さらに、血管浸潤を経験した患者は、ctDNA変異を有する可能性が高く(P=0.041)、無再発生存期間が短かった(P<0.001)。 変異遺伝子機能解析は、クロマチンリモデリング、Wnt/β-カテニンおよび JAK/STAT シグナル伝達、P53 細胞周期経路、エピジェネティック修飾因子、酸化ストレス経路、PI3K/AKT/MTOR 経路および RAS/RAF/ MAPK キナーゼ経路は、HCC の発癌において重要な役割を果たします。 .34 さらに、血管浸潤を経験した患者は、ctDNA変異を有する可能性が高く(P=0.041)、無再発生存期間が短かった(P<0.001)。変異遺伝子の機能解析は、クロマチン リモデリング、Wnt/β-カテニンおよび JAK/STAT シグナル伝達、P53 細胞周期経路、エピジェネティック修飾因子、酸化ストレス経路、PI3K/AKT/MTOR 経路、および RAS/RAF/MAPK キナーゼ経路の変化が機能することを示唆しています。 HCC腫瘍形成における重要な役割.32,33 腫瘍関連変異を発見した研究で、Huang et al.ctDNA 依存性腫瘍関連変異の頻度は 19.5% で、特異性は 90% であることがわかりました。.34謝人”±執事、皆さん、皆さん、会いましょう、o。 .34 さらに、血管浸潤のある患者では、cDNA 変異が多く (P=0.041)、無病生存期間が短かった (P<0.001)。変異遺伝子の機能解析により、クロマチンリモデリング、Wnt/β-カテニンおよび JAK/STAT シグナル伝達、P53 細胞周期経路、エピジェネティック修飾因子、酸化ストレス経路、PI3K/AKT/MTOR 経路、および RAS/RAF/MAPK が明らかになりました。キナーゼ経路は、HCC の発癌において重要な役割を果たします。 32,33 腫瘍関連の突発を発見した研究で、Huang 等は、腫瘍関連の突発が ctDNA に依存する確率は 19.5%、特異性は 90% であることを発見した.34 さらに、血管侵襲を受けた患者は ctDNA を発症する可能性が高い.突然変異 (P = 0.041) とより短い無減量期間 (P < 0.001)。 32.33 ある项检测への相关突变的研究において、huang 等は、相关突变が ctdna に依存していることが 19.5% であること、特異性が 90% であることを発見した短期間の無減量期間（P < 0.001）。32,33 腫瘍関連変異を発見した研究で、Huang ら。腫瘍関連変異は 19.5% が cDNA に依存しており、その特異性は 90% であることがわかった 34。мутация (P = 0,041) および более короткая безрецидивная выживаемость (P <0,001). 突然変異（ P = 0.041）および無病生存期間の短縮（ P <0.001）。もう 1 つの一般的な HCC ドライバー遺伝子は TP53 で、変異率は 30% を超えています。研究によると、血液および尿中の ctDNA における TP53 変異の頻度は 5% から 60% の範囲であることが示されています。35 Johan の研究は、後期 HCC における ctDNA 突然変異スペクトルが、TERT プロモーター (51%)、TP53 (32%)、CTNNB1 (17%)、PTEN (8%)、 AXIN1 .、ARID2、KMT2D および TSC2 (それぞれ 6%)。36 β-カテニン (CTNNB1) がん遺伝子は、Wnt シグナル伝達経路において重要な役割を果たしています。転写コアクチベーター CTNNB1 は遺伝子発現を促進することができ、細胞増殖、アポトーシスの阻害、および血管新生につながる可能性があります。CTNNB1 は、TERT と相互作用して、肝細胞の形質転換を誘導することもできます。33 TERT プロモーターは、一部の固形腫瘍で頻繁に変異しています。HCCの悪性形質転換における最も初期の遺伝的変化の1つであるTERTの変化は、肝硬変肝細胞のテロメラーゼ再活性化につながり、増殖を促進し、老化を防ぐ可能性があります。33-37 TERT プロモーターの変異は、増殖性肝結節および早期 HCC 患者の 59 ～ 90% で発生し、生存に関連していることが報告されています。38
コピー数変化 (CNA) は、体細胞変異の重要なサブタイプです。研究によると、CNA の広範囲かつ局所的な負荷は、ある種の癌における腫瘍免疫浸潤および排除を予測できるゲノム シグネチャであることが示されています。39 活発な浸潤シグナル伝達、高い細胞溶解活性、重度の炎症、および HCC における抗原提示に関連する遺伝子マーカー。477 人の被験者の一塩基多型のデータ配列を分析した結果、中枢神経系への負担が少ないことが明らかになりました。対照的に、CNA負荷が高く、染色体が不安定な腫瘍は、免疫拒絶の徴候を示し、増殖、DNA修復、およびTP53機能障害と関連していた。徐ら。は、HCC グループが慢性肝疾患グループよりも高い CNA スコアを持っていることを示しました。40 単一細胞の全ゲノム配列決定を使用して、CNA は肝発癌の初期に出現し、腫瘍の進行中も比較的安定したままであることがわかりました。41 チョンら。は、HCC 患者で cfDNA レベルが有意に上昇し、cfDNA のゲノム全体の CNA が、ソラフェニブで治療された HCC 患者の重要な独立した予後マーカーであることを発見しました。42 CNA負荷が高い患者は、CNA負荷が低い患者よりも疾患の進行と死亡の可能性が高かった.オレリッヒら。は、コピー数不安定性指数 (CNI) を使用して、がん患者の cfDNA の CNA を評価できることを発見しました。進行がん患者は、全身化学療法と免疫療法に対する患者の反応を評価する対照群よりも有意に高い CNI スコアを示した。これらの結果は、リキッドバイオプシー標本で見つかった CNA が、進行がん患者の予後指標として役立つ可能性があることを示唆しています。全身療法の背景にあるHCC。
現在、ctDNA を検出するために使用される方法は、ターゲットを絞った方法とターゲットを絞っていない方法に分けることができます。簡単に言えば、デジタル ポリメラーゼ連鎖反応 (dPCR)、BEAMing デジタル PCR、Amplification Refractory Mutation System-PCR、Capp-Seq、Tam-Seq などのターゲットを絞った方法は、事前定義された遺伝子に非常に敏感です。全ゲノム配列決定や NGS などのオフターゲット手法により、ゲノム全体の全体像を包括的に把握できます。44 ターゲットパネルと比較して、全ゲノムシーケンシングは、点突然変異や挿入だけでなく、再配列やコピー数の変動も検出できます。予後、および CTC と cfDNA は、HCC の動的モニタリングに使用できる優れた指標です。45 さらに、cfDNA 分析は、HCC の検出においてより有用である可能性があります。ヤンら。は、HCC 患者の血漿中の cfDNA が、肝線維症患者および健常対照者よりも有意に高かったことを示しました。AFP と比較して、ctDNA は早期 HCC のより優れたスクリーニングマーカーであると予想されます。46 母集団の cfDNA とタンパク質を検査した 47 のリキッドバイオプシーの前向き研究では、HCC 患者と HCC のない患者を区別するのに有効であることが示された。331 人の超音波正常患者と AFP 陰性患者の追跡調査では、HCC を診断するための cfDNA の感度と特異度はそれぞれ 100% と 94% であったため、cDNA は無症候性 HBsAg 血清反応陽性の個人で HCC を検出できました。Yeo48 研究では、RASSF1A プロモーターの高メチル化が高頻度 (92.5%) で HCC 患者に見られました。さらに、徐ら。特異性と感度がそれぞれ 90.5% と 83.3% の特定のメチル化マーカーのパネルを使用して、HCC を予測する診断モデルを作成しました。このパネルにより、HCC 患者を他の肝疾患患者と区別することができ、AFP よりも優れています。彼らはまた、陽性と判定された正常な対照は、HBV感染やアルコール使用歴などのHCCの危険因子を持っている可能性があることも発見しました.25 HCCの高リスク因子がcfDNAの過剰メチル化を促進し、それがHCCの進行に寄与する可能性があるという仮説を立てているため、高リスクグループのスクリーニングにおいてcfDNAが重要な役割を果たす可能性があります。蔡ら。ctDNA変異の全範囲を要約し、患者の腫瘍量を評価するための堅牢な戦略を提供します.この戦略は、画像変化の中央値 4.6 か月前に腫瘍形成を特定でき、血清バイオマーカー AFP、AFP-L3、および PIVKA-II と比較して優れた診断性能を示しています。cDNA 検査の診断的価値は、画像評価が利用できない場合に実証されているため、cDNA 検査は、高リスク群の早期 HCC の診断に価値があります。最近、科学者は NGS 技術を使用して、3204 の臨床サンプルと cfDNA における多変量遺伝的変異 (5-ヒドロキシメチルシトシン、5'-モチーフ、断片化、ヌクレオソーム トレース、HIFI を含む) の指標を分析しました。3 つの独立したトレーニング セット、テスト セット、およびテスト セットを含む 50 の再検証された HIFI モデルは、HCC 固有のテスト セットおよびテスト セットでそれぞれ 95.79% および 95.42% の感度で、HCC 集団と非 HCC 集団との間の安定した信頼できる識別を示しました。性別はそれぞれ 95.00% と 97.83% でした。HCC と肝硬変の鑑別には、HIFI 法の診断価値は AFP よりも高い。さらに、ctDNAは外科的治療にも使用されます。あつしら。HCC患者のctDNAの術前血清レベルを決定し、cDNA陽性群の再発率と肝外転移率がcDNA陰性群よりも有意に高く、cDNAレベルが有意に相関していることを発見しました。腫瘍の進行を伴います。51 高感度のバイオマーカーであるため、ctDNA は HCC が血管に侵入する能力を予測できます。王ら。46 人の HCC 患者の全ゲノム配列決定を行った多変量解析では、微小血管への浸潤に関する cDNA バリアントのアレル頻度の閾値は 0.83%、感度 89.7%、特異度 80.0% であることが示されました。切除可能なHCCにおける微小血管浸潤の独立した危険因子であり、cDNAが最適な治療を導くのに役立つ可能性があることを示唆しています.結論として、ctDNA は HCC の発生と発症に完全に関与しており、早期スクリーニング、外科的評価、疾患モニタリングに使用できます。
CTC は、血流に転移する原発腫瘍または転移に由来する悪性細胞です。腫瘍細胞はマトリックスメタロプロテイナーゼ (MMP) を分泌します。MMP は基底膜を破壊し、腫瘍細胞が血管やリンパ管に直接入ることを可能にします。ただし、ほとんどの CTC は、アノイキス、免疫攻撃、またはせん断応力によって急速に除去されます。53 上皮間葉転換 (EMT) により、CTC は原発腫瘍組織から容易に分離され、毛細血管に侵入し、生存率、転移、侵襲性、および薬剤耐性が大幅に改善されます。研究は、原発性転移性腫瘍のさまざまな腫瘍細胞の間に深刻な不均一性があることを示しています。したがって、CTC 分析は、腫瘍細胞の不均一性の包括的な理解につながる可能性があります。54
HCC 関連 CTC の特定のマーカーには、グリピカン-3 (GPC3)、アシアロ糖タンパク質受容体 (ASGPR)、上皮細胞接着分子 (EpCAM)、および CD44、CD90、55、細胞間接着分子 1 (ICAM1) などの幹細胞関連マーカーが含まれます。) .56 GPC3 マーカーは、HCC の病理学的分析と特徴付けに臨床的に使用される細胞膜固定タンパク質です。57 GPC3 の発現は、中分化および低分化の HCC 腫瘍細胞でより一般的であり、肝外遊走を促進します。さらに、GPC3+ CTC の存在は、転移性 HCC を示します。58 ASGPR は、肝細胞の表面にのみ発現する膜貫通タンパク質であり、高分化型 HCC で高度に発現しています。EpCAM は、CTC を捕捉するために最も一般的に使用される膜結合タンパク質の 1 つです。EpCAM は幹細胞の特徴を持つ HCC 細胞の表面マーカーとして同定されており 59、血管浸潤、評価された AFP レベル、バルセロナ病院 (BCLC) における肝がんの進行期など、HCC のさまざまな臨床病理学的特徴と相関しています。60 CTC EMT 表現型は転移性が高いです。CTC の 54 EMT プロセスは、HCC 転移を促進します。ビメンチン、ツイスト、E-box 亜鉛フィンガー結合 (ZEB) 1、ZEB2、カタツムリ、ナメクジ、E-カドヘリンなどの EMT マーカーの発現は、HCC 患者の肝臓由来 CTC で研究されています。58 Cheng によって開発された CanPatrol™ システム [61] は、主に発現するマーカーに基づいて CTC を 3 つの表現型サブグループに分類しました: 上皮表現型 (EpCAM、CK8/18/19)、間葉表現型 (ビメンチン、コイル状)、および混合表現型。176 人の患者では、HCC と良性肝疾患との鑑別において、総 CTC が AFP よりも優れていました。合計 CTC、AFP、および合計 CTC と AFP の合計の AUC 値は、0.774 (95% CI、0.704–0.834)、0.669 (95% CI、0.587–0.750)、および 0.821 (95% CI、0.756–0.886) でした。 ）。）、 それぞれ。EMT に基づく CTC 分類は、HCC の診断、早期再発、転移、および全期間の短縮を予測できます。
現在、CSC を検出する方法には、物理的方法と生物学的方法があります。生物物理学的特性に基づく濃縮と呼ばれることが多い物理的方法は、主にサイズ、密度、電荷、移動性、変形性などの CSC の物理的特性に依存します。物理的特性に応じて、ろ過ベースのシステム、誘電泳動などのさまざまな方法があります。免疫親和性ベースの濃縮としても知られる後者は、腫瘍特異的バイオマーカーに対する抗体を使用するため、主に抗原抗体結合に基づいています。 EpCAM、ASGPR、ヒト上皮成長因子受容体 2 (HER2)、前立腺特異抗原 (PSA)、ヒト パンサイトケラチン (P-CK)、カルバモイルリン酸シンターゼ 1 (CPS1) など。62 非濃縮法と呼ばれる別のタイプでは、フローサイトメトリーを使用して、より高い核対細胞質比とサイズに基づいて CTC を白血球と区別します。現在、CTC を検出するために FDA が承認した唯一の検査は、EpCAM 細胞表面マーカーを使用する Cell-Search™ システムです。 しかし、マーカーベースの CTC 検出を組み合わせることで、陽性率を高めることができます. -CK および CPS1、および 100% の割合で HCC 患者を良性肝疾患または非 HCC 癌の患者と区別しました.64 Wang による研究では、42 人の HCC 患者の 60% で EpCAM+ CTC が検出され、両方の陽性の間に有意な相関関係が見つかりました。率と TNM 期の CTC の数.カットオフ 20 ng/mL での AFP の 57.0% および 90.0% と比較して、95.0% の特異性.66 AFP と CTC の組み合わせは、HCC 検出を改善する可能性があります.45 HCCのリスクが高い。 しかし、マーカーベースの CTC 検出を組み合わせることで、陽性率を高めることができます. -CK および CPS1、および 100% の割合で HCC 患者を良性肝疾患または非 HCC 癌の患者と区別しました.64 Wang による研究では、42 人の HCC 患者の 60% で EpCAM+ CTC が検出され、両方の陽性の間に有意な相関関係が見つかりました。率と TNM 期の CTC の数.カットオフ 20 ng/mL での AFP の 57.0% および 90.0% と比較して、95.0% の特異性.66 AFP と CTC の組み合わせは、HCC 検出を改善する可能性があります.45 HCCのリスクが高い。ただし、CTC のマーカーベースの組み合わせ検出は、陽性結果の割合を増加させる可能性があります.54 抗 ASGPR 抗体と CPS1 抗体の混合物は、HCC 患者で 91% の CTC 検出率を達成しました.ASGPR、P-CK、および CPS1 に対する抗体を備えた CTC-Chip を使用し、HCC 患者と良性肝疾患または非 HCC 患者を 100% の割合で区別しました。частота и количество ЦОК со стадией TNM.65 Guo и соавторы обнаружили, что показатель ПЦР, полученный из ЦОК, был повышен у 125/171 (73%) пациентов, у которых уровень АФП был <20 нг/мл с чувствительностью 72,5% и специфичность 95,0% по сравнению с 57,0% и 90,0% для АФП при пороговом уровне 20 нг/мл.66 Комбинация АФП и ЦОК может улучшить обнаружение ГЦК.45 Считается, что ЦОК имеют преимущество перед АФП при раннем скринингеぐりん。 65 Guo らは、AFP レベルが 20 ng/mL 未満の患者 171 人中 125 人 (73%) で CTC 由来の PCR が上昇し、感度は 72.5%、特異度は20 ng/mL のカットオフレベルでの AFP の 57.0% および 90.0% と比較して 95.0%.66 AFP と CTC の組み合わせは、HCC の検出を改善する可能性があります。グループ。HCCのリスクが高い。ただし、CTC のマーカーベースの組み合わせ検出により、陽性結果の割合が増加する可能性があります。54 抗 ASGPR 抗体と CPS1 抗体の混合物は、HCC 患者で 91% の CTC 検出率を達成しました。63 張ら。ASGPR、P-CK、および CPS1 に対する抗体を含む CTC チップを使用し、HCC 患者を良性肝疾患および非 HCC 患者と 100% 区別しました。64 Wang の研究では、42 人の HCC 患者で EpCAM+ CTC の 60% が特定され、TNM 段階での CTC の発生率と数の間に有意な相関関係があることがわかりました。 65 Guo 等が発見した、AFP レベル < 20 ng/mL の 125/171 (73%) 名の患者では、CTC 遺伝子の PCR の分率が高く、感度は 72.5%、特異性は 95.0% であるが、AFP は停止している20 ng/mL のときの特異性は 57.0% と 90.0% でした。 65 Guo 等は、レベル <20 ng/ml の 125/171 (73%) の名前の患者、 、ctc 衍生 PCR 分、感度は 72.5%、95.0%、AFP は截停止 截停止 截停止 截停止 截停止 截にあることを発見しました２０ｎｇ／ｍＬ時の比％％は９０．０ｎｇ／ｍＬであった65 郭ら。обнаружили, что у 125/171 (73%) пациентов с уровнем АФП <20 нг/мл показатели ПЦР, полученные с помощью ЦОК, были повышены с чувствительностью 72,5% и специфичностью 95,0%, в то время как АФП на уровне отсечки Специфичность составляла 20 ng/ml. は、AFP レベルが 20 ng/mL 未満の 125/171 (73%) の患者で、CTC 由来の PCR 値が感度 72.5% および特異性 95.0% で上昇し、AFP はカットオフ特異性であったことを発見しました。 20 ng/mL でした。ml は 57.0% と 90.0% でした。66 ORP と CTC の組み合わせは、HCC の検出を改善します。45 CTC は、高リスク HCC 集団の早期スクリーニングにおいて AFP よりも優れていると考えられています。したがって、CTC陽性および高リスクHCCグループでは、CTC検査を超音波およびAFP検出と定期的に組み合わせる必要があります。ただし、CTC は腫瘍の転移と再発の重要な予測因子と考えられており、CTC の検出は診断ツールとして単独では推奨されていません。62 したがって、CTC は、現在使用されている他のマーカーよりも優れた予測バイオマーカーとして機能する可能性があります。 Zhou らは、EpCAM+ CTC と制御性 T 細胞の数が多い患者は、CTC の数が少ない患者よりも HCC 再発のリスクが高く、再発率は 66.7% 対 10.3% (P < 0.001) であることを発見しました。同様の研究が Zhong らによって報告されました。 68 さらに、Qi は、早期疾患の患者を含む HCC 患者 112 人中 101 人 (90.81%) が CTC 陽性であり、3 回の治療後に非常に小さな HCC 結節が検出されたことを発見しました。フォローアップの5ヶ月まで。 Zhou らは、EpCAM+ CTC と制御性 T 細胞の数が多い患者は、CTC の数が少ない患者よりも HCC 再発のリスクが高く、再発率は 66.7% 対 10.3% (P < 0.001) であることを発見しました.67 A同様の研究が Zhong らによって報告された 68。さらに、Qi は、早期疾患の患者を含む HCC 患者 112 人中 101 人 (90.81%) が CTC 陽性であり、3 ～ 5ヶ月のフォローアップ。 Чжоу и др。обнаружили, что у пациентов с повышенным количеством ЦОК EpCAM+ и регуляторных Т-клеток риск развития рецидива ГЦК был выше, чем у пациентов с низким количеством ЦОК, с коэффициентом рецидивов 66,7% против 10,3% (P <0,001)67. Zhou らは、EpCAM+ CTC と制御性 T 細胞が上昇した患者は、CTC が低い患者よりも HCC 再発のリスクが高く、再発率が 66.7% 対 10.3% (P<0.001) であることを発見しました 67。同様の研究が Zhong らによって行われました。68. さらに、Qi は、初期疾患の患者を含む HCC 患者 112 人中 101 人 (90.81%) に CTC があり、3 ～ 5 か月の追跡調査後に非常に小さな HCC 結節が検出されたことを発見しました。 Zhou らは、CTC 数が少ない患者と比較して、EpCAM+ CTC および T 細胞数が多い患者は、HCC 発症率がそれぞれ 66.7% および 10.3% であることを発見しました (P < 0.001)。 Zhou 等は、ctc の数が少ない患者と比較して、epcam+ ctc および t 細胞の数が少ない患者と比較して、hcc の発生率がより高く、それぞれの発生率は 10.3% ( p <0.001)。 Чжоу и др。обнаружили, что пациенты с повышенным количеством ЦОК EpCAM+ и регуляторных Т-клеток имели более высокий риск рецидива ГЦК по сравнению с пациентами с меньшим количеством ЦОК, с частотой рецидивов 66,7% и 10,3% соответственно (P <0,001). 周ら。EpCAM+ CTC と制御性 T 細胞が上昇した患者は、CTC が少ない患者と比較して HCC 再発のリスクが高く、再発率はそれぞれ 66.7% と 10.3% であることがわかりました (P < 0.001)。同様の研究が Zhong らによって報告されました。68 さらに、Qi は、早期疾患の患者を含む 112 人の HCC 患者のうち 101 人 (90.81%) が CTC の結果が陽性であり、3 回の来院後に非常に小さな HCC 結節を発見したことを発見しました。5ヶ月まで観察。彼らはまた、慢性 HBV 感染患者 12 人に CTC を発見し、CTC 陽性患者 2 人に 5 か月以内に小さな HCC 腫瘍を発見した。69 したがって、CTC は HCC の予測に使用できますが 70、予測バイオマーカーとしてより日常的に使用できます。
cfDNA と同様に、cfRNA はさまざまなシステムを通じて血流に放出されます。末梢血中のこれらの分子は、起源の癌組織を表しています。非侵襲的な方法で検出されるマーカーと比較して、cfRNA はより動的に調節され、組織特異的で、細胞外環境に豊富に存在します。HCC における 71 の miRNA (miRNA) の重要性と診断上の価値は、多くの研究で報告されています。miRNA は、ターゲット メッセンジャー RNA (mRNA) の翻訳を阻害することにより、さまざまな分子生物学的活性を調節する内因性の非コード RNA (ncRNA) です。miRNA は、エキソソームにカプセル化されたアポトーシス小体に位置していますが、末梢血中の血清タンパク質や脂質にも安定して結合することができ、HCC の評価に使用できます。マイクロRNAは、肝臓の再生、脂質代謝、アポトーシス、炎症、およびHCCの発生に関与しています。miR-21、miR-155、miR-221 などの 72 発がん性 miRNA は、HCC でよく知られています。特に、miR-21 は細胞外マトリックスでのコラーゲン合成と線維化に重要な役割を果たし、造血幹細胞を活性化することで肝発癌を促進します。72,73 HCC における腫瘍抑制 miRNA には、miRNA-122、miRNA-29、Let-7 ファミリー、および miRNA-15 ファミリーが含まれます。Let-7 ファミリーは、RAS ファミリーを標的とする多くの腫瘍抑制 miRNA で構成されています。miR-15 ファミリーには、miR-15a、miR-15b、miR-16、miR-195、および miR-497 が含まれ、特定の mRNA に相補的な配列を持っています。さらに、長い非コード RNA (lncRNA) と環状 RNA (cirRNA) も、HCC の早期スクリーニングに重要です。lncRNAs は、mRNA 様 ncRNAs を含む ncRNAs の最も広いクラスを表し、多くの人間の病気の病因に関与しています。LncRNA は、肝臓の微小環境と慢性肝疾患において調節的な役割を果たします。74 CircRNA は、遺伝子発現の調節において複数の機能を持つ ncRNA のクラスでもあります。最近、circRNAはHCCの診断ツールと見なされています。
循環する遊離 RNA は、温度、pH、および RNase に対する耐性を含む顕著な安定性を備えているため、標準的な RNA 精製法を使用して末梢血から fnRNA を分離する手間が軽減されます。最も一般的に使用される方法には、NGS、マイクロアレイ、RT-qPCR などがあります。NGS により、マイクロ RNA をゲノム全体で測定できます。ただし、この方法は高価であり、分析は標準化されていません。対照的に、RT-qPCR は安価で、核酸を迅速に増幅し、より高い感度、より高い精度、より広いダイナミック レンジ、必要なサンプル数が少ないなど、多くの利点を提供します。マイクロアレイは、標的miRNAと相補的DNAプローブとの高感度かつ特異的なハイブリダイゼーションに基づくmiRNA検出に使用される別の方法ですが75、マイクロアレイデータの分析には時間がかかります。
循環する miR-122 と Let-7 は、高リスク群の早期 HCC、HBV 関連前悪性結節および早期 HCC 患者のマーカーの診断に潜在的に有用であることが報告されています。76 蔡ら。Let-7 ファミリーのメンバー (miR-92、miR-122、miR-125b、miR-143、miR-192、miR-16、miR-126、および miR-199a/b) は、慢性疾患のリスクがあることがわかりました。肝炎患者におけるHCC。Let-7 ファミリーは、慢性 C 型肝炎に関連する高リスク群における HCC の発症を予測するための効果的なサロゲート バイオマーカーとして機能します。78 血清循環 MiR-107 も HCC の初期段階で評価されており 79、高リスク集団で良好な可能性が示されています。Zhouらは、miRNAのパネル（miR-122、miR-192、miR-21、miR-223、miR-26a、miR-27a、およびmiR-801）がHCCを慢性B型肝炎（CHB）および肝硬変と区別できることを報告しました感度はそれぞれ 79.1% と 75%、特異度は 76.4% と 91.1% でした。80 HBV 関連の HCC では、HCC のない慢性 HBV 患者と比較して、miR150 レベルが有意に低下していることがわかりました (感度 79.1%、特異度 76.5%)。-224 は健常対照者と比較して HCC で上昇し、サブグループ分析では HBV に関連する HCC 患者でより高いレベルが示されました。B 型肝炎関連肝硬変および HCC 患者は、異なるコントロールで HCC を検出できる 7 つの発現差のある siRNA を含む siRNA 分類子を特定しました。初期スクリーニングでの AUC 範囲は、AFP ボランティアよりも優れています。彼らは、4 つの miRNA (miR-1972、miR-193a-5p、miR-214-3p、および miR-365a-3p) が、HCC のある患者と HCC のない患者を区別できることを発見しました。5 つの過剰発現 miRNA (miR-122-5p、miR-125b-5p、miR-885-5p、miR-100-5p、および miR-148a-3p) は、特に HCC、肝硬変、および CHB バイオマーカーにおける HBV 感染の可能性があると考えられています。 miR-34a-5p は、肝硬変のバイオマーカーである可能性があり 85、ハイリスク集団における HCC の早期スクリーニングの潜在的なバイオマーカーである可能性があります。HCC で最も研究されている lncRNA は、肝臓がん (HULC) で高度に活性化されています。他の研究では、HCC 患者で循環している HULC を診断マーカーとして使用できることが示されています。これは、この lncRNA が健康な個人と比較して HCC 患者で高度にアップレギュレートされているためです。71,86 他の lnRNA の中でも、LINC00152 は、その高い AUC、感度、および特異性により、最良の診断用 lncRNA と見なされています。86 ある研究では、LINC00152 の末梢血発現は、正常な健常者から CHB および肝硬変の患者に向けて徐々に増加し、最終的に HCC で最も高くなりました。HCC 患者の血漿中の circSMARCA5 の発現に関する研究では、肝炎から肝硬変、前がん病変に至るまで、HCC での発現が徐々に低下することが示されています。87 ROC曲線の分析により、これらのcircRNAが、肝炎または肝硬変の患者とHCCの患者、特にAFPレベルが200 ng / mL未満の患者を区別する可能性が確認されました。さらに、Zhu は HBV 関連の HCC 患者の血漿サンプル中の 13,617 の環状 RNA を分析し、6 つの環状 RNA が HCC と HBV 関連の肝硬変で異なって発現することを確認し、cRNA が有益である可能性を示唆しました。肝疾患、硬化症患者などのハイリスクグループの早期スクリーニングのためのマーカー。88
エキソソームは、直径 40 ～ 160 nm の膜小胞です。複数の細胞内小胞が細胞膜と融合し、細胞外マトリックスに放出されます。それらは、脂質、タンパク質、RNA、および DNA を含む多くの活性成分を含み、HCC 細胞と非 HCC 細胞の両方の細胞間のコミュニケーションにおいて重要な役割を果たします。89,90 エキソソームは、肝細胞の線維芽細胞と星状細胞、免疫細胞、正常な肝細胞、HCC 細胞を活性化することにより、HCC の進行を調節します。91 腫瘍微小環境では、腫瘍細胞が多数のエキソソームを産生し、それが癌細胞から未成熟細胞に運ばれ、それらが発癌、分解、細胞シグナル伝達に関与します。92 研究により、病理学的プロセス中にエキソソームが癌遺伝子を正常細胞に伝達できることが示されています。これは、腫瘍の浸潤および転移のメカニズムの1つである可能性があります。93 癌の進行におけるエキソソームの役割は動的であり、癌の種類に特異的である可能性があります。細胞のシグナル伝達と代謝を仲介します。94 エキソソーム カーゴ分子の特徴と動的変化は、親腫瘍細胞の特徴と動的変化を直接反映しており、95 これはまた、がんの診断と予後におけるエキソソームの使用の基礎であり、抗がん治療に対する個々の反応を予測するための基礎でもあります。 ..96
エキソソームを分離および分析するための従来の検査方法は、超遠心分離、ろ過、サイズ排除クロマトグラフィー、免疫親和性精製、ウェスタンブロッティング、酵素結合免疫吸着アッセイ (ELISA)、PCR、フロー分析など、複雑で多段階で時間がかかります。マイクロ/ナノテクノロジーを使用した小型化されたシステムとラボオンチッププラットフォームは、エクソソームの迅速で便利な in situ 分離のために広く開発されています。ナノ粒子追跡分析 (NTA) は、磁性ナノ粒子やポリヒドロキシアルカノエートなどの方法を含む、エキソソームのサイズと濃度を特徴付けるために広く使用されている方法です。マイクロ流体および電気化学的方法でも、高収率でエキソソームを迅速に検出できます。
エキソソームタンパク質は、HCC の診断のための重要なマーカーです。Arbelaiz の研究では、98 RasGAP SH3 結合タンパク質 (G3BP) と高分子免疫グロブリン受容体 (PIGR) のレベルが HCC 由来のエキソソームで有意に上昇し、2 つのタンパク質の推定複合効果は AFP よりも優れていました。鉄の過負荷は、HCC の発症に寄与する重要な要因です。Tseng は、ヘプシジンが HCC に対する耐性において重要な役割を果たしている可能性があると報告しました。99 HCC 患者の血清に由来するエクソソームは、健康な対応物よりも有意に高いコピー数のヘプシジン mRNA バリアントを有し、ヘプシジンが HCC の新しい診断バイオマーカーである可能性を示唆しています。100 HCC によって産生されるエキソソーム内の 14-3-3ζ タンパク質は、T 細胞の活性化、増殖、および分化を低下させ、T 細胞の制御性 T 細胞への形質転換を誘導して、T 細胞の枯渇をもたらします。101 これは、HCC 腫瘍形成に寄与する可能性のある免疫監視からの腫瘍回避を調査するいくつかの研究によって裏付けられています 102。
血漿または血清中の ecRNA の存在に加えて、RNA が豊富なエキソソームは、初期の腫瘍スクリーニングにおける非侵襲的なリアルタイム ステージングに使用でき、腫瘍の進化と治療への反応を判断できます。HCC グループの血清中のエキソソーム miRNA-21 のレベルは、CHB グループの 2.21 倍高く、HCC グループでは健康な集団の 5.57 倍高かった。Wang の研究では、AUC 値が 0.83 (95% CI 0.74–0.93) および 0.94 (95% CI 0.88–1.00) で、エキソソームは肝硬変患者と比較して HCC を有意に増加させました。104 得られたデータは、発癌および HCC 進行の調節における特定のエキソソームカーゴ分子の関与を解明した。105 miR-221、miR-103、miR-181c、miR-181a、miR-93、および miR-26a の血清発現は一貫しています。および転移、および miR21 レベルは、健常対照者および CHB 患者よりも HCC 患者ではるかに高かった 102。研究によると、HCC 患者の血清由来のエキソソームは、HCC のない患者よりも増殖因子 β の形質転換によって活性化される LINC00161、LINC000635、および lncRNA のレベルが有意に高く、これらの lncRNA は TNM ステージおよび腫瘍体積と強く関連していることが示されています。110 コニグリアロら。CD90+ エキソソームは、血管内皮増殖因子 (VEGF) の放出と VEGF-R1 受容体の産生を大幅に増加させ、それによって血管新生を刺激する、高レベルの lncRNAH19 を発現することがわかりました。93 CircRNA は別のタイプのエキソソーム ncRNA であり、種全体でより低いが安定したレベルで発現し、circRNA は細胞タイプ、組織タイプ、発生段階、および調節活動に対しても特異性を示します。111 の circRNA は、早期および低侵襲がんの診断バイオマーカーです。112 最近の臨床試験では、HCC の予測における個々の miRNA の特異性は理想的ではないことが示されています。したがって、複数のアッセイ（例：AFP と組み合わせた miR-122 および miR-48a）を使用した複雑な検出は、早期 HCC の同定および肝硬変からの HCC の鑑別を改善する可能性があります。100
CHB および肝硬変の患者は、HCC を発症する最も一般的な高リスク群です。高リスク群については、持続的なウイルス学的反応が達成されたら、HCC リスクに基づいた費用対効果の高い監視戦略を開発する必要があります。早期スクリーニングは、HCC の診断と治療を高い費用対効果比で改善するための鍵となります2 ..がんの早期スクリーニング方法には多くの制限があります。ほとんどの種類のがんに対して有効な早期スクリーニング方法は開発されておらず、通常、遵守率は低いです。従来の早期スクリーニング方法と比較して、リキッドバイオプシー技術には明らかな利点があります。サンプリングの容易さ、パンラック検出、優れたサンプル再現性、および腫瘍の不均一性に対する効果的な対応です。リキッドバイオプシーに関連する方法の費用対効果を考えると、HCC スクリーニングでの使用は定期的にテストされていません。分子レベルでの正確な検出の進歩にもかかわらず、体液生検は対象患者の HCC を検出するのに費用がかかり、超音波や磁気共鳴画像法などの特定の画像化手順と比較して、その広範な使用が制限されています。113,114 しかし、以前の研究では、リキッドバイオプシーが質調整生存年数（QALY）に関して有意な利益を示したことが示された。115 胃と上咽頭の早期がんに対するリキッドバイオプシーの利点も示されています。116,117 現在の見解では、リキッドバイオプシーは、腫瘍の検出と診断において血清バイオマーカーと放射線スクリーニングを補完できるというものです。117 118
現在の文献によると、液体生検技術は、肝がんのリスクが高いグループの早期スクリーニングにおいて、感度と特異度が大幅に高いことが示されています。体液生検の種類に関係なく、HCC と HCC のないハイリスクの個人を区別できます。これは、ハイリスクの個人と健康な個人の違いが明らかであるため、早期のスクリーニングの重要性を示唆しています。ctDNA は半減期が短く、HCC の検出に使用できるため、腫瘍由来の cDNA の変化は、特に小さな腫瘍の場合、腫瘍進行の具体的な証拠をリアルタイムで提供できます。高レベルの ctDNA は、がんの発症と転移を示し、進行と再発の早期指標です。さらに、ctDNAの結果に基づいて、患者は個別の治療とフォローアップを受けることができます。119 特定のメチル化部位は、HCC および肝硬変結節の早期同定のための AFP よりも優れたマーカーである可能性があります。HCC の切除可能な症例では、高レベルの cDNA は、微小血管浸潤と術後の再発および転移を示しています。コピー数の変化は、HCC 患者の生存に関連しています。cDNA評価はHCCの全体的な治療に関与している可能性があり、cDNAは治療的調節の効果的な指標として機能すると考えられます。ctDNA の特定の遺伝子変異に基づくマーカーは、有効性を予測し、薬剤耐性を監視するために臨床ガイドラインに採用されています。ctDNA 検査は、早期スクリーニングのための最も有用なリキッドバイオプシー ツールである可能性があります。CTC は、ハイリスク HCC グループの早期スクリーニングにおいても重要な役割を果たします。HCC 関連 CTC のさまざまなマーカーは、HCC の発症、発症、および再発において特に重要です。膜小胞として、エキソソームは細胞間コミュニケーション、特に HCC 細胞に関与しています。循環マイクロRNAは血中で安定しているため、HCCの早期スクリーニングに役立つ可能性があります。徐々に、エキソソームタンパク質と RNA が豊富なエキソソームが発見され、それらの HCC に対する予測効果が確認されました。興味深いことに、HCC のさまざまな病因もさまざまな変異に関連している可能性があるため、HCC のさまざまな病因に基づいて早期スクリーニング用のさまざまなバイオマーカーを選択できます。120
ただし、現在の体液生検技術は安定性の点で疑問があり、HCCの早期スクリーニングまたはモニタリングを独立して実行することはできませんが、個々のスクリーニングと診断を補完することはできます。121 リキッドバイオプシーの一形態として、ctDNA、CTC、cfRNA、およびエキソソーム関連 AFP または PIVKA-II の検出と画像化は、HCC の早期診断と予後において有望な用途を持っています。しかし、血中への ctDNA 放出の正確なメカニズムはまだ解明されていません。ctDNA の基本的な生物学的特性を明らかにすることで、マーカーとしての使用が容易になる可能性があります。循環中の少量の ctDNA と厳格なサンプル処理要件は、HCC での cDNA 検出の臨床的実施に対する課題です。さらに、遺伝子変異には、発がん物質の正確な識別を可能にする特定の機能はありません。複数の遺伝的および体細胞変異体も正常組織に存在するため、体液生検によって同定された遺伝子変異は、HCC の早期スクリーニングにおける有用性が限られている可能性があります。122 cDNA を非腫瘍 DNA と区別するのに役立つ明確に定義された有用な遺伝子標的とバイオマーカーの限界は、cDNA の使用における最も重要な問題です。CTCの検出のための高感度および特異的マーカーの有用性の欠如。転移の可能性がある生存細胞のみが見つかり、CSC 濃縮マーカーの最適な組み合わせは不明でした。文化とその変異プロファイルの評価のための CTC の分離も、困難な作業です。エキソソームの同定、分離、精製に問題があるため、特定の分子メカニズムはまだ不明であり、エクソソームと HCC のメカニズムに関する以前の研究は詳細ではなく、miRNA、lncRNA、およびタンパク質がエクソソームに分類される方法についても詳しく説明されていません。 、エキソソームの取り込みが特定のタイプのプロセスであるかどうかは明らかではありません。HCC の診断と治療のためのエクソソームの使用は、まだ前臨床段階にあります。採血に使用されるチューブの種類、血液量、サンプルの保存と検出、分離と濃縮など、リキッドバイオプシー手順の標準化の欠如は、医療センター間での実践の違いにより、日常の臨床診療での使用を妨げる可能性があります。早期スクリーニング、診断、有効性評価、および HCC の予測におけるリキッドバイオプシーの有効性は、特に高リスク群についてはまだ検討されていません。リキッドバイオプシー技術は大きな可能性を秘めており、近い将来、肝臓がんの臨床現場で広く使用されることが期待されています。
1. Sung H.、Furley J.、Siegel RL 他。Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN は、185 か国の 36 種類のがんの発生率と死亡率を推定しています。CA 癌 J 臨床。2021;71(3):209-249.ドイ: 10.3322/caac.21660
2. 国家保健委員会の本部。原発性肝がんの診断と治療の基準 (2022 年版) [J]。ジャーナル オブ クリニカル リバー ディジーズ、2022、38(2): 288-303。ドイ: 10.3969/j.issn.1001-5256.2022.02.009
3. Zhou J、Sun H、Wang Z、他。肝細胞がんの診断と治療に関するガイドライン（2019年版）。肝臓がん。2020;9(6):682-720.ドイ: 10.1159/000509424
4. 国土 N、竹村 N、長谷川 K、他肝細胞がん診療ガイドライン：日本肝疾患学会2017年（JSH-HCC第4次ガイドライン）2019年更新。肝疾患リザーバー。2019;49(10):1109–1113.doi:10.1111/hepr.13411
5. Barrera-Saldana HA、Fernandez-Garza LE、Barrera-Barrera SA 慢性肝疾患におけるリキッドバイオプシー。アン・ヘパト。2021;20:100197.doi:10.1016/j.aohep.2020.03.008
6. Tai TKYu.、Tan P.Kh.液体乳がん生検：焦点を絞ったレビュー。Arch Pathol Lab Med.2021;145(6):678–686.ドイ: 10.5858/arpa.2019-0559-RA
7. Kanval F.、Singal AG 肝細胞癌のサーベイランス: 現在のベスト プラクティスと将来の方向性。消化器科。2019;157(1):54-64.doi:10.1053/j.gastro.2019.02.049
8. 欧州研究協会 L、欧州組織 R、C 治療学。臨床ガイドライン EASL-EORTC: 肝細胞癌の治療。Jヘパリン。2012;56(4):908–943.doi:10.1016/j.jhep.2011.12.001
9. Zhang G.、Ha SA、Kim HK 他。小肝細胞癌における有用な血清学的マーカーとしての AFP と HCCR-1 の複合分析: 前向きコホート研究。ディスマーク。2012;32(4):265–271.ドイ: 10.3233/DMA-2011-0878
10. チェン S、チェン H、ガオ S 他B型肝炎ウイルス関連肝疾患における血漿マイクロRNA-125bの差次的発現およびB型肝炎ウイルス誘発性肝細胞癌の診断の可能性。肝疾患リザーバー。2017;47(4):312-320。doi:10.1111/hepr.12739
11.ハレPR、フォスターF.、工藤M.ら。肝細胞癌におけるα-フェトプロテインの生物学と意義。肝機能2019;39(12):2214–2229。ドイ: 10.1111/liv.14223
12. 小俣正治、陳 AL、国道 N、他アジア太平洋地域における肝細胞がんの治療に関する臨床ガイドライン: 2017 年更新。国際肝疾患機構。2017;11(4):317–370.ドイ: 10.1007/s12072-017-9799-9
13. Xu Fei、Zhang Li、He Wei 他。肝細胞癌の中国人患者における血清PIVKA-II単独またはAFPとの併用の診断的価値。ディスマーク。2021;2021:8868370.ドイ: 10.1155/2021/8868370
14. Durin L.、Praradines A.、Basset S. ら。非小細胞肺癌 非血漿体液生検：腫瘍に近づく！細胞。2020;9(11).ドイ: 10.3390/cells9112486
15. Mader S、Pantel K. リキッドバイオプシー: 現在の状態と将来の展望。治療 Oncol Res.2017;40(7-8):404-408.ドイ: 10.1159/000478018
16. Palmirotta R、Lovero D、Cafforio P、他。液体ベースのがん生検：臨床腫瘍学におけるマルチモーダル診断ツール。Adv Med Oncol.2018;10:1758835918794630。ドイ: 10.1177/1758835918794630
17. Mandel P.、Metais P. ヒト血漿中の核酸。CR Seances Soc Biol Fil。1948;142(3-4):241-243。
18. Mouliere F、Chandrananda D、Piskorz AM、他。フラグメントサイズ分析による循環腫瘍DNAの高度な検出。科学は医学を翻訳します。2018;10:466。doi:10.1126/scitranslmed.aat4921
19. Underhill HR、Kitzman JO、Hellwig C.ら。循環腫瘍 DNA 断片の長さ。PLOS遺伝子。2016;12(7):e1006162.doi:10.1371/journal.pgen.1006162
20. Cheng F、Su L、Qian C. 循環腫瘍 DNA: 液体ベースの癌生検における有望なバイオマーカー。ターゲット腫瘍。2016;7(30):48832–48841.doi:10.18632/oncotarget.9453
21. Bettegovda S.、Sauzen M.、リアリー RJ 他。ヒト悪性腫瘍の初期および後期における循環腫瘍 DNA の検出。科学は医学を翻訳します。2014;6(224):224ra24.doi:10.1126/scitranslmed.3007094
22. Mehes G. 固形がんの突然変異予測分析のためのリキッドバイオプシー: 病理学者の視点。Jバイオテクノロジー。2019;297:66-70。ドイ: 10.1016/j.jbiotec.2019.04.002
[PubMed] 23. Lenarts L、Tuveri S、Yatsenko T、他。循環血漿 DNA スクリーニングによる早期腫瘍検出: 誇大宣伝か希望か?ベルギーの臨床法。2020;75(1):9-1 doi:10.1080/17843286.2019.1671653
24. 西田 N. ヒト肝発癌における DNA メチル化に対する肝炎ウイルスと加齢の影響。組織病理学。2010;25(5):647–654.ドイ: 10.14670/HH-25.647
投稿時間: Sep-23-2022
